Resolution Microscopy
해상도 현미경

분자 규모까지 공간적 정밀도와 분해능을 제공하는 STED(Stimulated Emission Depletion)를 기반으로 하는 형광단 위치 파악 및 초고해상도 현미경 개념인 MINSTED를 소개합니다.

STED(Stimulated Emission Depletion) 현미경과 같은 포인트 스캐닝 초해상도 현미경 기술은 3차원에서 하위 회절 제한 해상도로 생물학적 샘플을 관찰하는 강력한 도구입니다.

PLP1 환자와 건강한 섬유아세포 모두에서 Seahorse XF 세포외 분석기로 미토콘드리아 호흡을 측정하고 초고해상도 현미경(회전 디스크 핀홀 기반 구조 조명 현미경, SD-SIM)으로 ER과 미토콘드리아 사이의 상호 작용을 조사했습니다.

우리는 또한 αvβ3 인테그린 병소 주위에 클러스터된 Panx1 채널, P2X7 수용체 및 CaV3 전압 개폐 Ca2+ 채널의 복합체인 "골세포 메카노솜"의 수와 조직의 변화를 평가하기 위해 면역조직화학과 함께 초해상도 현미경(Structured Illumination microscopy 또는 SIM)을 사용했습니다. 골 세포 과정에.

여기에서 3차원(3D) 초고해상도 현미경, 살아있는 세포 이미징 및 기계 학습 기반 계산을 사용하여 3가지 다른 기능 모듈의 CME 단백질의 세포내이입 역학, 액틴 존재 및 기하학을 분석했습니다.

여기에서 우리는 뇌 유래 신경영양 인자로 자극한 후 배양된 운동뉴런의 축삭에서 소포체와 리보솜의 빠른 움직임을 조사하기 위해 고해상도 현미경 및 라이브 세포 이미징을 사용했습니다.

세포 내 분획 분석, 투과 전자 현미경 및 단일 분자 초해상 현미경을 사용하여 LLS가 박테리아 세포막 및 세포질과 관련되어 있으며 박테리아 세포 외 공간으로 분비되지 않음을 확인했습니다.

그러나 초해상도 현미경 및 투과 전자 현미경과 같은 이미징 방법을 결합하면 측정 가능한 정밀도로 전자 현미경에서 볼 수 있는 구조의 형광을 찾기 위해 기준 마커를 사용한 상관 관계가 필요합니다.

이 연구에서 우리는 조직 병리학을 위한 매력적인 고처리량 초해상도 현미경 플랫폼으로서 광자 칩을 심문합니다.

이 연구에서 우리는 조직 병리학을 위한 매력적인 고처리량 초해상도 현미경 플랫폼으로서 광자 칩을 심문합니다.

단일 분자 추적 및 고해상도 현미경을 사용하여 노킨 마우스의 1차 해마 뉴런에서 neurexin1β 및 neurexin3β를 검출함으로써 내인성 β-뉴렉신이 흥분성 및 억제성 시냅스의 절반 미만에 존재함을 입증합니다.

emerin이 핵 외피에서 분자 스캐폴딩에 참여하고 기계적 스트레스로부터 핵을 보호하는 방법을 정의하기 위해 단일 분자 추적 및 초고해상도 현미경을 사용하여 나노 규모의 공간 조직을 구축했습니다.

단일 분자 초해상도 현미경(SRM)은 단일 분자 검출과 기존 공초점 현미경보다 10배 향상된 공간 분해능을 결합합니다.

요약 광표백 후 단일 분자 형광 복구(smFRAP)는 단일 분자 초해상도 현미경과 기존의 FRAP 현미경을 결합한 새로 개발된 기술입니다.

확률적 광학 재건 현미경(STORM)은 전통적으로 독성 및 비생리적 이미징 버퍼와 라이브 세포 연구에 도움이 되지 않는 설정을 필요로 하는 광학 초해상도 현미경(SRM) 기술입니다.

직접 확률적 광학 재구성 현미경(dSTORM)과 같은 초고해상도 현미경 접근 방식은 EM에 대한 형광 기반의 정량적 대안을 제공합니다.

정확한 초해상도 이미지 재구성을 위해 대규모 가우시안 패턴 위치 파악이 필요한 위치 기반 초해상도 현미경 및 이미지 스캐닝 현미경.

딥 러닝 네트워크를 기반으로 회절 제한 이미지의 단일 프레임에서 초해상도 이미지를 재구성하는 단일 프레임 초해상도 현미경(SFSRM) 접근 방식을 개발하여 ~20에서 라이브 셀 초해상도 이미징을 지원합니다. nm 공간 분해능 및 수천 개의 시점에서 최대 10ms의 시간 분해능.

이 리뷰에서는 전자현미경, 원자력현미경, 공초점현미경, 초고해상도현미경을 사용하여 분자 어셈블리를 시각화하는 대표적인 예를 강조합니다.

또한, 이러한 시스템은 특히 IBN을 근거리 주사 광학 현미경, 암시야 현미경, 공초점 현미경 또는 초초점 현미경과 결합하여 단일 종양 세포 검출과 같은 보다 표준적인 진단 도구로는 접근할 수 없는 풍부한 정보를 제공합니다. 해상도 현미경, 또는 유기체에서 형광 화합물의 확산과 같은 특정 동적 현상의 강조 표시, 예.

여기에서 우리는 C에서 HL 순응 동안 틸라코이드 막의 거시적 구조적 변화를 조사하기 위해 살아있는 세포 초해상 현미경과 분석 막 부분분할을 결합했습니다.

여기에서 게놈 접근법 및 살아있는 세포 초해상도 현미경과 결합된 유도성 단백질 degron 시스템을 사용하여 H2A를 보여줍니다.

AlexaFluor 647 표지된 phalloidin이 dSTORM 방식에 사용되었고 Atto 655 표지된 lifeact가 단일 분자 이미징, 가역적 결합 방식에 사용된 단일 분자 기반 초해상도 현미경에 사용하기 위한 라벨을 비교했습니다.

최근 몇 년 동안 초고해상도 현미경과 단일 분자 이미징을 포함한 광학 현미경의 발전으로 많은 바이러스 복제 단계를 살아있는 세포에서 동적으로 시각화할 수 있게 되었습니다.

이 장에서는 dSTORM에 의한 단일 분자 국소화 현미경에 특별한 초점을 두고 초해상도 현미경으로 스핑고리피드에 레이블을 지정하고 시각화하는 단계별 프로토콜을 제공합니다.

SDCM은 기존 현미경(면역형광, 소분자 염색 및 형광 제자리 혼성화) 및 초고해상도 현미경( 단일 분자 국소화 현미경 및 확장 현미경).

여기에서 분자간 단일 분자 Förster 공명 에너지 전달과 함께 초해상도 현미경을 사용하여 시스 및 트랜스 상호 작용의 상호 협력성을 입증했습니다.

이 한계를 극복하기 위해 우리는 배열 단층 촬영과 Förster 공명 에너지 전달(FRET)의 두 가지 고해상도 현미경 기술을 결합하여 AD(n=9) 및 연령 일치 대조군 사례(n=6)의 측두 피질에서 백만 개 이상의 개별 시냅스 말단을 이미지화했습니다. ).

고해상도 현미경 및 생화학 실험은 TFEB가 미토콘드리아 기질에 국한된다는 것을 추가로 확인했습니다.

이 새로운 기능을 통해 광산란 대비가 있는 고해상도 현미경을 사용할 수 있을 뿐만 아니라 렌즈를 사용하는 거의 모든 광산란 분광 응용 분야에도 사용할 수 있습니다.

단일 접합 분자 위치 및 클러스터링을 초해상도 현미경으로 분석했습니다.

초해상도 현미경은 생물학적 시스템의 더 작은 구성 요소를 연구하기 위해 기존 광학 현미경에 영향을 미치는 아베 회절 한계를 극복하기 위해 개발되었습니다.

이 작업에서 우리는 높은 공간 및 시간 해상도 현미경을 사용하여 GSC 세포 주기 전반에 걸쳐 이전 히스톤과 새 히스톤을 모두 추적합니다.

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따라서 우리는 EGFR 기능과 원형질막 나노도메인에 대한 DHA 유도 변경 사이의 기계적 연결을 조사하기 위해 초고해상도 현미경 기술을 사용했습니다.

우리는 생세포 및 초해상도 현미경 기술을 사용하여 제대로 이해되지 않은 이 클라트린 구조의 동적 조직을 밝혀냈습니다.

STED 및 PALM/STORM과 같은 초해상도 현미경 검사법은 방사체의 상태 전이를 조작하여 잠재적으로 무제한 분해능을 제공함으로써 원거리 광학 형광 현미경 검사법에 혁명을 일으켰습니다.

단백질체학, BioID에 의한 단백질 상호작용 연구 및 초해상도 현미경법은 이 중심체 유형의 구성, 구조 및 기능에 대한 이해에 상당한 진전을 가져왔습니다.

고해상도 현미경은 ZEO-IO가 클럽벨 구조와 100-200 nm의 입자 크기 범위를 나타내는 것으로 나타났습니다.

초고해상도 현미경은 식물 핵층 단백질 NMCP1과 NMCP2가 필라멘트 번들과 함께 필라멘트 네트워크로 구성되어 있음을 보여주었습니다.

마이크로어레이 및 고해상도 현미경 분석은 ANGPT2 과발현을 내피 세포에 국한시킬 수 있으며 저산소증 및 TGF-β1이 잠재적 자극으로 확인되었습니다.

TZM과 Nb-Zr 시스템의 결합 메커니즘은 이론적 계산과 고해상도 현미경 분석을 기반으로 논의되었습니다.

시냅스의 정량화 및 초고해상도 현미경은 성숙한 뉴런 네트워크에서 ECM의 고갈이 억제성 시냅스의 밀도와 개별 억제성 시냅스 후 스캐폴드의 크기를 우선적으로 감소시키는 것으로 나타났습니다.

초고해상도 현미경은 상호작용이 유전적이고 접합에 의존적인 것으로 나타났습니다.

B7-2 및 B7-1을 발현하는 이종 세포에 대한 초해상도 현미경 실험은 B7-2가 B7-1에 비해 상대적으로 길고 더 큰 클러스터를 형성함을 시사합니다.

이전의 고해상도 현미경 실험은 외부 작용제 펩티드-MHC 복합체에 의한 밀접 접촉 영역의 안정화가 T 세포에 선행하기 때문에 여기에 보고된 폐쇄 접촉 영역 형성의 감도 및 선택성이 T 세포 인식과 관련이 있음을 나타냅니다. 실험에서 신호 및 활성화.

결론 우리는 컨볼루션 신경망이 핵의 국소화 기반 초해상도 현미경 이미지를 정확하고 빠르게 분할할 수 있는 강력한 도구임을 발견했습니다.

이러한 계층적 패킹은 대규모 염색질 조직의 초해상도 현미경 이미지에서도 동일하게 볼 수 있습니다.

여기에서, 초해상도 현미경은 PTPδ가 흥분성 및 억제성 시냅스의 시냅스 후 스캐폴드에 정확하게 접한 시냅스 틈에 국한된다는 것을 보여줍니다.

고해상도 현미경 검사는 >100개의 딸 세포 쌍에서 비대칭 주형 가닥 분리의 증거를 보여주지 않으므로 비대칭 DNA 분리가 제브라피쉬 개발에서 불멸 가닥 가설에 따라 돌연변이 부담을 방지하는 것은 불가능합니다.

여기에서 단일 및 다중 탄소 이온에 의해 유도된 DNA 손상 패턴은 다양한 고해상도 현미경 접근 방식으로 핵 염색질 환경에서 분석되었습니다.

그리고 이제 초고해상도 현미경 접근 방식과 극저온 단층 촬영의 개선으로 중심소체 및 중심체 구조에 대한 비할 데 없는 나노 규모의 상세한 그림이 제공되고 있습니다.

형광 sublancin 및 형광 표지된 PTS 단백질을 사용한 초해상도 현미경 연구는 세포의 극에서 둘 다의 국소화를 밝혀냈습니다.

더욱이, 최근의 초해상도 현미경 연구에서 주장하는 바와 같이, 액틴 고리 조직에 대한 상충되는 결과로 인해 축색 돌기의 주기적인 액틴-스펙트린 네트워크 구조에 관한 현재의 의견이 논란이 되고 있습니다.

여기에서 우리는 단일 인간 세포에서 NPC의 3D 구조를 탐색하기 위해 계산 분류 및 평균화와 결합된 3D 초해상도 현미경의 힘을 탐구했습니다.

우리는 수천 개의 개별 인플루엔자 비리온을 이미지화하기 위해 신속한 자동 분석 파이프라인과 결합된 형광 초해상도 현미경을 사용하여 크기, 형태 및 막 내장 및 내부 단백질의 분포에 대한 정보를 얻었습니다.

FPM(Fourier Ptychographic Microscopy)은 초고해상도 현미경 기술로, 이 기술에서 광원의 각도를 변경하고 반복 알고리즘을 변경하여 샘플의 다른 주파수 성분을 포함하는 저해상도 이미지 세트를 얻을 수 있습니다. 고해상도 강도 및 위상 정보를 재구성하는 데 사용됩니다.

최근에 개발된 초고해상도 현미경 기술은 호중구 소포 이동, 세포외 유출 및 분자 수준에서 관련 기능을 조절하는 분자 메커니즘을 이해하는 데 도움이 되는 비할 데 없는 기회를 생성했습니다.

NS1은 핵 염색질과 관련되어 있지만 초해상도 현미경은 NS1이 게놈 DNA와 함께 국소화되지 않음을 보여줍니다.